Одновременное применение Cy5-модифицированных производных дезоксиуридина и дезоксицитидина в ПЦР [] / С. А. Лапа, Т. О. Гусейнов, А. С. Павлов [и др.] // Биоорганическая химия. - 2020. - Т. 46, № 4. - С. 418-424 : 2 рис., 1 табл. - Библиогр.: с. 423-424 (18 назв. ) . - ISSN 0132-3423
Рубрики: Биология Общая биохимия Кл.слова (ненормированные): дезоксиуридин -- дезоксицитидин -- индодикарбоцианиновые красители -- модифицированные дезоксинуклеозидтрифосфаты -- полимеразная цепная реакция Аннотация: Изучены особенности одновременного встраивания в растущую цепь ДНК модифицированных Cy5-дезоксиуридинов (Cy5-dU) и дезоксицитидинов (Cy5-dC) в ПЦР с Taq ДНК-полимеразой. Исследования проводили для попарного встраивания нуклеотидов, модифицированных флуорофорами, обладающими суммарным положительным, нейтральным и отрицательным зарядом. Варьировали долю модифицированых дезоксинуклеозидтрифосфатов (Cy5-dUTP и Cy5-dCTP) к природным аналогам (dTTP и dCTP) от 0 до 100% каждого в реакции, т. е. до полного замещения. Проводили сравнение с индивидуальным встраиванием соответствующих модифицированных производных. Пары (Cy5-dU + Cy5-dC) применяли для амплификации фрагментов бактериальных геномов длиной 126, 283 и 370 пар оснований. Увеличение длины амплифицируемого фрагмента ДНК снижало выход продукта при использовании Cy5-модифицированных нуклеотидов в выбранных условиях амплификации. Электроотрицательные Cy5-dNTPs проявляли наименьший ингибирующий эффект на ПЦР, в то время как электронейтральные - обеспечивали большую плотность встраивания меток в растущую цепь ДНК. Доп.точки доступа: Лапа, С. А.; Гусейнов, Т. О.; Павлов, А. С.; Шершов, В. Е.; Кузнецова, В. Е.; Заседателев, А. С.; Чудинов, А. В. Нет сведений об экземплярах (Источник в БД не найден) |